Recuento y Viabilidad en Hemocitómetro
¿Ya contó las células en el hemocitómetro? Introduzca los conteos de viables y no viables, el número de cuadrados grandes contados y el factor de dilución (por ejemplo 2 para una mezcla 1:1 con azul de tripano). La calculadora devuelve las concentraciones total y viable, el porcentaje de viabilidad y — si indica el volumen de la muestra — el total de células en la suspensión. El resultado alimenta directamente la Calculadora de Siembra Celular.
Calculadora
Introduzca sus recuentos y calcule para ver las concentraciones
Células viables por mL
Nota de laboratorio
cells per mL = (cells counted ÷ squares counted) × dilution factor × 10,000
En una cámara Improved Neubauer estándar cada cuadrado grande es de 1 mm² y la cámara tiene 0,1 mm de profundidad, así que un cuadrado contiene 0,1 µL — la millonésima parte de un litro. Una célula en un cuadrado equivale por tanto a 10 000 células por mL antes de la dilución. La viabilidad es viables ÷ total × 100.
Acerca de este cálculo
Qué es
A hemocytometer is a thick glass slide with a precisely etched counting chamber. Each large 1 mm² square holds a known volume (0.1 mm³ = 0.1 µL for the standard Neubauer), so counting cells in a small set of squares and dividing by the counted volume gives the concentration. Trypan blue stains non-viable cells; counting them separately yields a viability percentage.
Por qué se usa
Every cell-culture experiment starts with a known cell concentration and viability. Hemocytometer counts are the bench standard for that: cheap, fast, and accurate enough to drive routine plating decisions and sterility checks.
Por qué existe esta calculadora
The arithmetic (sum × dilution × 10⁴ per mL) is a fixed power-of-ten transform that is easy to misremember and impossible to spot-check by eye. The calculator applies the factor, computes viability, and propagates the count through to a total cells number if you have a sample volume.
Supuestos clave
- The cells were uniformly suspended at the time of sampling.
- You counted the standard 1 mm² large squares (or know the equivalent volume for a different chamber).
- Trypan blue exclusion is a valid proxy for viability for your cell type.
Limitaciones
- It does not detect small cells or subcellular debris; consider a calibrated automated counter for those.
- It does not model clumping; if cells are clumped, an accurate count requires disaggregation first.
- Trypan blue exclusion overestimates viability in some contexts (e.g. some apoptotic cells still exclude dye).
Qué calcula
- Células viables por mL cells/mL
- Concentration of live cells — the value to use for seeding.
- Células totales por mL cells/mL
- Viable plus non-viable concentration.
- Viabilidad %
- Viable cells ÷ total cells × 100.
- Total de células contadas
- Viable plus non-viable across all counted squares.
- Media de células por cuadrado
- Total counted ÷ squares counted.
- Total cells in sample
- Only when a sample volume was supplied.
- Viable cells in sample
- Only when a sample volume was supplied.
Preguntas frecuentes
¿Qué es una cámara de Neubauer (hemocitómetro) y cómo pasa el conteo a concentración?
La cámara de Neubauer es una cámara de recuento de vidrio grabado con profundidad conocida: sobre cada cuadrado grande de 1 mm² de una cámara estándar mejorada de Neubauer hay exactamente 0,1 µL de suspensión. Como ese volumen es fijo, un conteo manual se convierte directamente en una concentración: células por cuadrado × factor de dilución × 10⁴ da células por mL. Esta calculadora aplica esa conversión y devuelve células totales/mL, células viables/mL y porcentaje de viabilidad a partir de los conteos introducidos.
¿Cómo uso la calculadora de hemocitómetro — qué introduzco?
Introduzca las células viables (brillantes, sin teñir) y no viables (teñidas de azul de tripano) sumadas en los cuadrados contados, el número de cuadrados grandes y el factor de dilución — 2 para una mezcla 1:1 con azul de tripano, o 1 si la muestra no estaba diluida. Si añade el volumen total de la suspensión, la calculadora informa además del total de células y de células viables en toda la muestra. Junto a las concentraciones muestra el total de células contadas y la media por cuadrado.
¿Cómo se calcula la viabilidad celular con azul de tripano?
Las células vivas excluyen el colorante y quedan brillantes; las muertas lo absorben y se tiñen de azul, y la viabilidad es simplemente viables ÷ (viables + no viables) × 100. La calculadora lo calcula a partir de sus dos conteos y avisa cuando la viabilidad cae por debajo del 70 % o cuando se han contado tan pocas células que el resultado no es estadísticamente fiable. Un conteo total de cero da una viabilidad indefinida, que la calculadora reporta como «no definida» en lugar de 0 %.
¿Cuántos cuadrados debo contar en una cámara de Neubauer?
La convención típica son los cuatro cuadrados grandes de 1 mm² de las esquinas, y usted indica a la calculadora cuántos contó realmente para que la media por cuadrado se calcule bien. Contar menos de 4 cuadrados grandes activa un aviso, porque los conteos pequeños llevan un error de muestreo real. Contar más cuadrados reduce el error del conteo manual, y homogeneizar bien la suspensión antes de cargar la cámara importa igualmente.
¿Qué hago con el resultado una vez contado?
Las células viables por mL son el número que usa su siguiente paso. Tras calcular, el resultado ofrece acciones que llevan la concentración viable a la Calculadora de Siembra Celular o a la Calculadora de Normalización de Placa, donde llega precargada en el campo de concentración. El flujo en el banco es, por tanto: contar y comprobar la viabilidad y, después, planificar los volúmenes de suspensión y medio por recipiente, o diluir la suspensión a una concentración de trabajo común.
Solo para uso en investigación y docencia. No destinado a decisiones clínicas o de diagnóstico. Verifique siempre los cálculos de forma independiente antes de usarlos en aplicaciones críticas.