Hämocytometer-Zellzählung & Viabilität
Haben Sie Zellen auf dem Hämocytometer gezählt? Geben Sie die Zählungen lebender und nicht lebender Zellen, die Anzahl der gezählten großen Quadrate und den Verdünnungsfaktor (zum Beispiel 2 für eine 1:1-Mischung mit Trypanblau) ein. Der Rechner liefert Gesamt- und Lebendkonzentration, Viabilitätsprozente und — wenn Sie das Probenvolumen angeben — die Gesamtzellzahl in der Suspension. Das Ergebnis fließt direkt in den Zell-Aussaat-Rechner.
Rechner
Zählungen eingeben und berechnen, um Konzentrationen zu sehen
Vitale Zellen pro mL
Laborhinweis
cells per mL = (cells counted ÷ squares counted) × dilution factor × 10,000
In einer Standard-Neubauer-Kammer (verbessert) ist jedes große Quadrat 1 mm² groß und die Kammer 0,1 mm tief, ein Quadrat fasst also 0,1 µL — das Millionstel eines Liters. Eine Zelle in einem Quadrat entspricht daher 10.000 Zellen pro mL vor Verdünnung. Die Vitalität ist vital ÷ gesamt × 100.
Zu dieser Berechnung
Worum es geht
A hemocytometer is a thick glass slide with a precisely etched counting chamber. Each large 1 mm² square holds a known volume (0.1 mm³ = 0.1 µL for the standard Neubauer), so counting cells in a small set of squares and dividing by the counted volume gives the concentration. Trypan blue stains non-viable cells; counting them separately yields a viability percentage.
Warum man es verwendet
Every cell-culture experiment starts with a known cell concentration and viability. Hemocytometer counts are the bench standard for that: cheap, fast, and accurate enough to drive routine plating decisions and sterility checks.
Warum es diesen Rechner gibt
The arithmetic (sum × dilution × 10⁴ per mL) is a fixed power-of-ten transform that is easy to misremember and impossible to spot-check by eye. The calculator applies the factor, computes viability, and propagates the count through to a total cells number if you have a sample volume.
Wichtige Annahmen
- The cells were uniformly suspended at the time of sampling.
- You counted the standard 1 mm² large squares (or know the equivalent volume for a different chamber).
- Trypan blue exclusion is a valid proxy for viability for your cell type.
Einschränkungen
- It does not detect small cells or subcellular debris; consider a calibrated automated counter for those.
- It does not model clumping; if cells are clumped, an accurate count requires disaggregation first.
- Trypan blue exclusion overestimates viability in some contexts (e.g. some apoptotic cells still exclude dye).
Was berechnet wird
- Vitale Zellen pro mL cells/mL
- Concentration of live cells — the value to use for seeding.
- Zellen gesamt pro mL cells/mL
- Viable plus non-viable concentration.
- Vitalität %
- Viable cells ÷ total cells × 100.
- Insgesamt gezählte Zellen
- Viable plus non-viable across all counted squares.
- Durchschnittliche Zellen pro Quadrat
- Total counted ÷ squares counted.
- Total cells in sample
- Only when a sample volume was supplied.
- Viable cells in sample
- Only when a sample volume was supplied.
Häufig gestellte Fragen
Was ist eine Neubauer-Zählkammer (Hämozytometer), und wie wird aus der Zählung eine Konzentration?
Die Zählkammer ist eine geätzte Glaskammer mit bekannter Tiefe: über jedem großen 1-mm²-Quadrat einer verbesserten Standard-Neubauer-Kammer sitzen genau 0,1 µL Suspension. Weil dieses Volumen feststeht, wird eine manuelle Zählung direkt zu einer Konzentration — Zellen pro Quadrat × Verdünnungsfaktor × 10⁴ ergibt Zellen pro mL. Dieser Rechner wendet diese Umrechnung an und liefert Gesamtzellen/mL, lebende Zellen/mL und Viabilitätsprozente aus Ihren Zählungen.
Wie benutze ich den Hämocytometer-Rechner — was gebe ich ein?
Geben Sie die Summen der lebensfähigen (hellen, ungefärbten) und nicht lebensfähigen (trypanblaugefärbten) Zellen über die ausgezählten Quadrate ein, dazu die Anzahl der großen Quadrate und den Verdünnungsfaktor — 2 bei einer 1:1-Mischung mit Trypanblau, oder 1 bei unverdünnter Probe. Optional geben Sie das Gesamtvolumen der Suspension an; dann meldet der Rechner auch Gesamt- und Vitalzellzahl in der ganzen Probe. Neben den Konzentrationen zeigt er die ausgezählte Gesamtzellzahl und den Mittelwert pro Quadrat.
Wie berechnet man die Zellviabilität mit Trypanblau?
Lebende Zellen schließen den Farbstoff aus und bleiben hell; tote nehmen ihn auf und färben sich blau, und die Viabilität ist einfach lebensfähig ÷ (lebensfähig + nicht lebensfähig) × 100. Der Rechner berechnet das aus Ihren beiden Zählungen und warnt, wenn die Viabilität unter 70 % fällt oder wenn so wenige Zellen gezählt wurden, dass das Ergebnis statistisch nicht verlässlich ist. Eine Gesamtzählung von null ergibt eine undefinierte Viabilität, die der Rechner als „nicht definiert“ meldet statt als 0 %.
Wie viele Quadrate soll ich in einer Zählkammer auszählen?
Übliche Konvention sind die vier 1-mm²-Eckquadrate, und Sie teilen dem Rechner mit, wie viele Sie tatsächlich gezählt haben, damit der Mittelwert pro Quadrat dazu passt. Weniger als 4 große Quadrate lösen einen Hinweis aus, weil kleine Zählungen einen echten Probenahmefehler tragen. Mehr Quadrate zu zählen verringert den manuellen Zählfehler, und die Suspension vor dem Beschicken der Kammer gründlich zu mischen, ist genauso wichtig.
Was mache ich mit dem Ergebnis, nachdem ich Zellen gezählt habe?
Die lebenden Zellen pro mL sind die Zahl, die Ihr nächster Schritt braucht. Nach dem Berechnen bietet das Ergebnis Aktionen, die die vitale Konzentration in den Zell-Aussaat-Rechner oder den Platten-Normalisierungsrechner übernehmen, wo sie vorausgefüllt im Konzentationsfeld ankommt. Der Ablauf auf der Bank ist also: zählen und Viabilität prüfen, dann Suspensions- und Medienvolumina pro Gefäß planen oder die Suspension auf eine gemeinsame Arbeitskonzentration verdünnen.
Nur für Forschung und Lehre. Nicht für klinische oder diagnostische Entscheidungen. Prüfen Sie Berechnungen vor kritischen Anwendungen immer eigenständig nach.