Calcolatore di diluizione seriale
Progetta una serie di diluizioni seriali per micropiastre o provette. Inserisci la concentrazione di partenza, il numero di passaggi, il fattore di diluizione (o la diluizione cumulativa finale) e il volume di lavoro per provetta o pozzetto. Il calcolatore restituisce il volume di trasferimento a ogni passaggio, la concentrazione corrente e la diluizione cumulativa.
Calcolatore
Inserisci i valori e calcola per vedere il piano provetta per provetta
Concentrazione finale della provetta
Nota da banco
Tube-by-tube plan
| Provetta | Solvent | Transfer | Diluizione | Concentration |
|---|
Vsolvent = Vtransfer ÷ (F − 1) · Cn = Cstock ÷ Fn
Una diluizione 1:F mescola una parte di campione con (F − 1) parti di solvente, quindi ogni provetta viene precaricata con un volume di trasferimento ÷ (F − 1) di solvente. Dopo la miscelazione, lo stesso volume passa alla provetta successiva, moltiplicando la diluizione per F a ogni passo. La concentrazione della provetta n è la soluzione stock divisa per F elevato a n.
Informazioni su questo calcolo
Che cos'è
Una diluizione seriale è una diluizione per passaggi in cui ogni provetta è diluita dalla precedente per un fattore fisso (comunemente 1:2, 1:5 o 1:10). Dopo n passaggi, la diluizione cumulativa è il fattore per passaggio elevato alla n.
Perché si usa
Coprire diversi ordini di grandezza in un’unica piastra è pratico solo quando ogni pozzetto è una frazione del precedente. Le diluizioni seriali sono la spina dorsale di curve standard, saggi di MIC e titolazioni.
Perché esiste questo calcolatore
Scegliere un volume di trasferimento pipettabile e accurato attraverso una serie a più passaggi è un piccolo ciclo aritmetico, ma la diluizione cumulativa è facile da enunciare in modo errato. Il calcolatore restituisce ogni passaggio in un’unica tabella, così puoi vedere l’intera serie prima di iniziare.
Ipotesi fondamentali
- La miscelazione è perfetta a ogni passaggio (ogni trasferimento si equilibra completamente prima del prelievo successivo).
- Il volume di lavoro per passaggio è sufficiente a prelevare il volume di trasferimento con la pipetta disponibile.
- Nessuna evaporazione o perdita di volume tra i passaggi.
Limiti
- Non modella l’errore volumetrico cumulato; per serie lunghe valuta una verifica indipendente della provetta finale.
- Non corregge per campioni viscosi o non ideali.
- Assume lo stesso fattore di diluizione a ogni passaggio — serie eterogenee richiedono una tabella manuale.
Che cosa calcola
- Per-tube plan
- For each tube: solvent volume, transfer volume, concentration, and dilution vs. stock.
- Final concentration
- Concentration in the last tube, in the stock unit.
- Total dilution
- Dilution factor of the final tube relative to the stock.
- Total solvent volume
- Combined solvent to pre-fill all tubes.
Domande frequenti
Come si pianifica una diluizione seriale con questo calcolatore?
Inserisci la concentrazione dello stock con la sua unità, il fattore di diluizione di ogni passaggio (×F), il volume di trasferimento (in mL o µL) e il numero di provette (da 1 a 12). Il calcolatore restituisce una tabella provetta per provetta — quanto solvente pre-riempire, il volume da trasferire e la concentrazione dopo ogni passaggio — più la concentrazione finale, la diluizione totale e il volume totale di solvente da preparare.
Come vengono calcolati i volumi delle provette e le concentrazioni per passaggio?
Ogni provetta segue la convenzione 1:F: 1 parte di campione più (F − 1) parti di solvente, quindi il pre-riempimento di solvente è il volume di trasferimento diviso per (F − 1). La concentrazione dopo il passaggio i è quella dello stock divisa per F elevato alla i, e dopo n provette la diluizione totale è F elevato a n. In una diluizione seriale (scalare) 1:10 di 6 provette con trasferimento da 1 mL, ogni provetta riceve 1/9 mL di solvente prima del primo trasferimento e l’ultima provetta è diluita 10^6 volte.
Cosa significa il fattore di diluizione per passaggio e perché deve essere maggiore di 1?
Il fattore di diluizione per passaggio indica quante volte ogni provetta è più diluita della precedente: 2 per una serie 1:2, 10 per una serie 1:10. Un fattore di 1 o inferiore non descrive alcuna diluizione, quindi il calcolatore lo rifiuta con un errore. Mantieni lo stesso fattore per tutte le provette — lo strumento applica un unico fattore di diluizione all’intera serie.
Quali unità di concentrazione posso usare per una diluizione seriale?
Il calcolatore accetta M, mM, µM, mg/mL, µg/mL, cellule/mL e UFC/mL, e tutte le concentrazioni nei risultati restano nell’unità inserita. Si usa direttamente da uno stock in µM o da una coltura contata in UFC/mL. Fa solo l’aritmetica della diluizione — per convertire unità o contare le piastre serve un altro strumento.
A cosa fare attenzione nel pianificare diluizioni seriali per i conteggi in piastra?
Il calcolatore avvisa quando il volume di trasferimento scende sotto la soglia pratica di pipettaggio di 2 µL, perché i piccoli errori si accumulano lungo la serie e l’ultima provetta diventa la meno accurata. Segnala anche quando fattore e numero di provette spingono la diluizione totale oltre ciò che è calcolabile con precisione — riduci il fattore o i passaggi. Nota che pianifica solo i volumi: scegliere quali diluizioni cadranno nel tuo intervallo conteggiabile di UFC resta una tua decisione.
Solo per uso didattico e di ricerca. Non destinato a decisioni cliniche o diagnostiche. Verificare sempre i calcoli in modo indipendente prima di usi critici.