핵산 농도 계산기
분광광도계의 A260 측정값을 표준 흡광 계수(dsDNA 50 µg/mL, RNA 40 µg/mL, ssDNA 33 µg/mL)를 사용해 DNA 또는 RNA 농도로 환산합니다. 측정 시 사용한 희석 배수를 입력하고, 선택적으로 A280을 입력해 A260/A280 순도비를 계산합니다.
계산기
측정값을 입력하고 계산하여 농도를 확인하세요
농도
실험실 메모
c (µg/mL) = A260 × dilution factor × factor
260 nm에서 흡광도 1.0은 이중가닥 DNA 50 µg/mL, 단일가닥 DNA 33 µg/mL 또는 RNA 40 µg/mL에 해당합니다. 희석 배수로 측정값을 원래 시료로 환산합니다. 수율 = 농도 × 부피 ÷ 1000.
이 계산에 대해
무엇을 하는 계산인가
핵산은 260 nm에서 흡광하며, 1 cm 경로 길이에서 1 mg/mL 용액의 흡광도는 공인된 상수입니다(dsDNA 50, RNA 40, ssDNA 33). 희석한 분취액의 A260을 측정하고 희석 배수와 적절한 상수를 곱하면 스톡 농도를 얻습니다.
왜 사용하는가
Every downstream application — PCR, sequencing, transfection, in vitro transcription — needs an accurate nucleic acid concentration. A260 is the most accessible bench measurement, but the constant and dilution must be applied correctly.
이 계산기가 필요한 이유
Mixing up the absorbance factor (50 vs 40 vs 33) or forgetting the dilution factor are the two classic bench errors. The calculator makes the constant explicit, multiplies by your dilution, and reports a purity ratio when you also provide an A280.
주요 전제
- 분광광도계가 시료를 희석한 것과 같은 완충액으로 올바르게 영점 조정되었습니다.
- 시료가 A260에서 Beer–Lambert 법칙을 적용할 만큼 충분히 순수합니다(A260 < 약 1.5).
- 경로 길이가 1 cm입니다(또는 다른 경로 길이로 보정된 기기를 사용합니다).
한계
- A260 cannot distinguish DNA from RNA — use a fluorometric assay for that.
- Contaminants such as phenol or carbohydrates inflate A260, producing overestimated concentrations.
- Very low concentrations (A260 < 0.05) are at the noise floor of standard spectrophotometers.
계산 결과 항목
- 농도 µg/mL
- Analyte concentration in the original sample: A260 × dilution factor × conversion factor.
- 총 수율 µg
- Total mass of analyte in the final volume (shown when a volume is supplied).
- A260/A280 비율
- Purity indicator (shown when A280 is supplied). Typical pure ranges: dsDNA 1.7–2.0, ssDNA 1.8–2.0, RNA 1.9–2.1.
자주 묻는 질문
A260 측정값을 DNA 또는 RNA 농도로 어떻게 환산하나요?
블랭크 보정된 A260에 총 희석 배수와 측정 대상의 환산 계수를 곱합니다. 농도(µg/mL) = A260 × 희석 배수 × 계수입니다. 이 계산기는 대상을 선택하면 알맞은 계수를 자동으로 적용하여 원래 시료의 농도를 알려줍니다. 최종 부피도 입력하면 총 수율(µg)을 함께 반환합니다.
환산 계수 50, 40, 33의 차이는 무엇인가요?
이 값들은 표준 흡광 상수입니다. A260이 1.0이면 dsDNA는 50 µg/mL, RNA는 40 µg/mL, ssDNA는 33 µg/mL에 해당합니다. 필요한 계수는 측정하는 대상에만 의존하므로 Analyte 항목에서 dsDNA, ssDNA, RNA를 선택하세요. 잘못된 상수를 적용하는 것은 이 계산기가 막도록 설계된 두 가지 전형적인 벤치 실수 중 하나입니다.
순수한 핵산의 A260/A280 비율은 얼마가 좋은가요?
일반적인 순도 범위는 dsDNA 1.7–2.0, ssDNA 1.8–2.0, RNA 1.9–2.1입니다. 선택적으로 A280 측정값을 입력하면 이 계산기는 A260/A280 비율을 알려주고 대상의 범위를 벗어난 값에 표시를 붙입니다. 단백질 등 오염물이 측정값에 영향을 줄 수 있기 때문입니다. 비율이 낮은 것은 시료가 망가졌다는 뜻이 아니라 순도 경고이며, 이 비율로 모든 오염물을 검출할 수는 없습니다.
측정 전에 만든 희석을 보정해야 하나요?
네. 측정 전 시료에 가한 총 희석을 입력하면, 계산기가 이를 곱해서 보고되는 농도가 희석된 분취액이 아니라 원래 튜브의 값이 되도록 합니다. 예를 들어 2 µL 시료를 100 µL에서 읽으면 희석 배수는 50입니다. 이 배수를 잊는 것이 나머지 하나의 전형적인 벤치 실수이며, 적용한 희석만큼 농도를 과소 보고합니다.
A260 정량으로 알 수 없는 시료의 특징은 무엇인가요?
A260은 260 nm 부근에서 흡광하는 핵산을 재는 것이므로, 단백질·페놀·유리 뉴클레오타드 같은 오염물이 겉보기 농도를 부풀리고, 온전한 물질과 분해된 물질을 구별하지 못합니다. 또한 1 cm 광로장(또는 동등한 마이크로볼륨 광학)에서 블랭크 보정된 측정을 전제합니다. 완전성은 젤이나 프래그먼트 분석으로 확인하고, 순도 비율은 대략적인 스크리닝 도구로 취급하세요.
연구 및 교육 용도로만 사용하십시오. 임상 진단이나 의료 결정에 사용할 수 없습니다. 중요한 작업에 사용하기 전에 항상 계산 결과를 독립적으로 확인하십시오.